Como desnaturar uma proteína

Talvez você queira desnaturar uma proteína para um projeto de ciências, ou talvez tenha lido sobre comida desnaturada e quer saber como isso funciona. A desnaturação é o processo pelo qual uma proteína perde sua forma e estrutura devido a ações de forças externas, incluindo calor, radiação, ácidos e solventes. Solventes orgânicos geralmente desnaturar proteínas. A maneira exata que você desnatura uma proteína depende do que você deseja trabalhar, já que todos exigem diferentes agentes desnaturantes em diferentes níveis. A maioria de qualquer proteína pode ser desnaturada, porém, se você sabe o que mudar no ambiente da proteína.

Passos

Método 1 de 2:
Desnaturando uma proteína
  1. Imagem intitulada Denature Uma Proteína Passo 1
1. Use o calor. O calor é uma das maneiras mais fáceis e maneiras mais comuns de desnaturar uma proteína. Quando a proteína em questão está presente em alimentos, simplesmente cozinhar a comida desalatará as proteínas. Muitas proteínas podem ser desnaturadas expondo-as a uma temperatura ou superior a 100 ° C (212 ° F). Isso permite que as proteínas coagulem e reduzam sua solubilidade.
  • A duração da exposição depende do que você está expondo ao calor. Um ovo, por exemplo, pode cozinhar em uma panela em fogo médio em cinco minutos, enquanto um assado pode levar horas para cozinhar em um forno.
  • Denature uma proteína Passo 2
    2. Aplicar álcool. Álcool interrompe as ligações de hidrogênio que ocorrem entre os grupos de amida de uma ligação peptídica. Quando uma proteína é exposta a uma solução de álcool, as moléculas de álcool formam novas ligações com a cadeia de proteína. Use uma solução de 70% de álcool para romper a parede celular de bactérias e desnaturar a proteína.
  • Álcoois concentrados podem ser perigosos, pois são inflamáveis ​​e tóxicos. Sempre use equipamentos de segurança completos, incluindo luvas e proteção dos olhos, e alça em um ambiente seguro e controlado por temperatura.
  • Denature uma proteína Passo 3
    3. Mudar o ph. A estrutura interna de uma proteína pode ser dividida quando seu ambiente é muito ácido ou muito alcalino, pois perturbaram as ligações iônicas que mantêm as pontes de sal da proteína juntos. Adicione uma solução de ácido ou base à proteína. O ambiente circundante deve estar a um pH de 10 ou abaixo de 4 para incentivar a desnaturação. Se você está induzindo a mudança com ácido, o pH deve estar entre 2 e 5.
  • Mudar o pH pode ionizar um aminoácido, dependendo da pila de cada grupo funcional naquele aminoácido. Você também pode ionizar o grupo amino ou grupo carboxilo presente no aminoácido.
  • Imagem intitulada Denature uma Proteína Passo 4
    4. Tente sais de metal pesado. Metais pesados ​​podem interromper as ligações na proteína, fazendo com que ela perca sua estrutura. Sais de metais pesados, como mercúrio e chumbo podem ser usados ​​para desnaturar diferentes proteínas. Esses sais estão disponíveis na maioria dos fornecedores químicos, e devem sempre ser usados ​​com cautela e equipamentos de segurança adequados, incluindo luvas e proteção dos olhos.
  • Metais pesados ​​podem interagir com grupos de cadeia lateral funcional de proteína para formar complexos. Metais pesados ​​também oxidam as cadeias laterais de aminoácidos da proteína.
    • Método 2 de 2:
    Proteínas renaturantes


    1. Imagem intitulada Denature uma Proteína Passo 5
    1. Determinar se uma proteína pode se refolder. Algumas formas de desnaturação são permanentes, enquanto outras podem ser desfeitas. Cozinhar um ovo ou carne, por exemplo, não pode ser desfeito, mas uma proteína que foi exposta a um pH elevado pode recuperar a forma quando colocada em um ambiente mais neutro.
    • Se a proteína pode ou não deve depender do seu DNA. O DNA manterá as informações necessárias para a proteína retornar ao seu estado nativo.
  • Imagem intitulada Denature uma Proteína Passo 6
    2. Remova o fator de desnaturação. Devolver o ambiente ao redor da proteína para a estase e remova o elemento desnaturado. Remova o ácido ou a base, por exemplo, ou traga a proteína de volta para uma temperatura mais razoável.
  • Imagem intitulada Denature uma Proteína Passo 7
    3. Use um kit de renaturação. Muitas empresas de suprimentos de laboratório vendem kits de renaturação que permitem que você tela para os melhores parâmetros para incentivar a renaturação. Tais kits podem ser especialmente úteis se você estiver olhando para proteínas em um ambiente de laboratório ou experimental.

    • Pontas

    Uma proteína desnaturada perde sua estrutura de quaraterdade, terciária e secundária que é aparente em seu estado nativo, mas sua estrutura primária permanecerá.
  • Uma proteína desnaturada também perde parte de sua bioatividade, em alguns casos, como nas enzimas, perdendo sua capacidade de funcionar. Por exemplo, os substratos não podem mais ser capazes de se ligar a enzimas que foram desnaturados.
  • A proteína desnaturada pode perder sua solubilidade em uma solução.
  • Você também pode desnaturar ácidos nucleicos usando técnicas de laboratório para separar as vertentes.
    • Compartilhe na rede social:
    Semelhante