Como endostar manchas

Um endosto é uma forma adormecida da bactéria que permite que ela sobreviva condições ambientais pobres. A mancha de esporos é uma mancha diferencial usada para detectar a presença e localização de esporos dentro de certas bactérias. Várias bactérias, especialmente as do gênero Bacillus e Clostridium, são conhecidos por produzir endósporos. A coloração endospecto é usada para fins de diferenciação e categorização de bactérias. Também é muito importante na medicina e na indústria alimentícia. Como eles são difíceis de destruir, é imperativo determinar se estão presentes em alimentos enlatados e, assim, evitar doenças para proteger os compradores.

Passos

  1. Imagem intitulada Endoso Stain Step 1
1. Prepare-se para o experimento colocando em luvas, usando um revestimento de laboratório e coletando materiais. Veja as coisas que você precisará abaixo para referência. Pegue um slide e lave-o com sabão e água. Use papel bibuloso para secar o slide. Use um Sharpie Preto para desenhar um círculo na parte inferior do slide, a fim de identificar a área para a qual as bactérias serão manchadas.
  • Importante desgaste de segurança laboratorial consiste em óculos de proteção, sapatos fechados, luvas e casaco de laboratório.
  • Imagem intitulada Endospore Stain Step 2
    2. Chama o loop de inoculação e espere 10 segundos antes de colocar o loop na pipeta de bactérias.
  • Faça uma mancha de bactérias no slide. Chama o loop novamente e coloque o loop no rack de secagem. Flamejando o loop garante qualquer bactéria que possa ter residido sobre o loop antes de usá-lo é morto.
  • Imagem intitulada Endoso Stain Step 3
    3. Configure um queimador de bunsen no seu suporte com o grampo de anel e uma gaze de arame sobre ele.
  • Imagem intitulada Endospore Stain Step 4
    4. Encha a lata com água da torneira até que seja cerca de meio cheio. Coloque a lata em cima da gaze do fio no grampo do anel.
  • Imagem intitulada Endoso Stain Step 5
    5. Ligue o queimador de bunsen para aquecer / ferver a água.Deixe o Steam começar a aparecer antes de colocar o slide na lata.Coloque o slide com esfregaço no topo da lata.
  • Imagem intitulada Endoso Stain Step 6
    6. Coloque um pedaço de papel toalha no topo da mancha no slide e drenche a toalha de papel com o corante verde de malaquita.
  • Imagem intitulada Endospore Stain Step 7
    7. Vapor a mancha sobre a água por 5 minutos.
  • Se o verde malaquitório evapora, adicione mais. Mantenha o papel molhado.
  • Usar pinças para tirar o deslize quando terminar - será quente.
  • Imagem intitulada Endóspore Stain Step 8
    8. Permitir que o slide esfrie, remova o papel e enxágüe com água por 30 segundos.
  • Imagem intitulada Endóspore Stain Step 9
    9. Adicionar Safranin ao slide por 1 minuto. O copo de plástico pode ser usado para drenar o excesso de corante.
  • Imagem intitulada Endospore Stain Step 10
    10. Enxaguar o safranina com água, a fim de remover o excesso de corante. Blot o slide entre folhas de papel bibuloso para secar. Depois que o slide é seco, ele pode ser examinado sob um microscópio.
  • Imagem intitulada Endospore Stain Step 11
    11. Veja o slide. Coloque-o no palco. Para este tipo de mancha, as bactérias só podem ser vistas no objetivo mais alto (100x), conhecida como lente de imersão de óleo. Este óleo aumenta a resolução de energia e permitirá que a luz se concentre perfeitamente no espécime.


  • Imagem intitulada Endospore Stain Etapa 12
    12. Examine o slide para ver o endosso. A célula vegetativa aparecerá vermelha / rosa, enquanto o endosto em si é manchado verde. Esporos podem estar localizados terminal, meio ou subterminal dentro da célula vegetativa.

    • Coisas que você precisa

    • Bactérias apropriadas que produzem endósporos
    • Verde de Malachite
    • Safranin
    • Slides do microscópio
    • bico de Bunsen
    • Mostruário de aneis
    • Loop de inoculação
    • Gaze de arame
    • Posso
    • Microscópio
    • Papel bibuloso

    Pontas

    Leia atentamente as instruções.
  • Certifique-se de não fazer a mancha muito grossa porque isso causará complicações ao ver o endose.
  • Preste atenção no tempo durante o experimento.

    • Avisos

    Se os copos se quebrarem, descarte de vidro e bactérias através de meios apropriados. Além disso, certifique-se de seguir procedimentos de protocolo apropriados em todos os momentos em relação ao desgaste laboratório e equipamentos de manuseio.
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